检测蛋白质 A280 Pro

使用蛋白质 A280 应用定量分析含氨基酸(例如色氨酸或络氨酸)或 cys-cys 二硫键且在 280 nm 处表现出强吸光度的蛋白质样品,浓度越高(>62.5 A)准确度越高。 此应用报告 280 nm 处检测的蛋白质浓度和一个吸光度比 (A260/A280)。 也可使用一个单点基线矫正。 此应用不需要标准曲线。

 

 

开始之前...

使用 NanoDrop Ultra 仪器进行基座检测之前,抬起仪器检测臂,然后清洁上下基座。 至少需使用新的实验室抹布擦拭基座。 有关详细信息,请参阅“清洁基座”

注  如果您的样品中含有主要的肽键和很少或没有氨基酸,请使用蛋白质A205 应用而不是蛋白质 A280 Pro。

注意    

不要在仪器附近使用喷射器或喷雾瓶,因为液体会流入仪器并可能导致永久性损坏。

不要在基座上使用氢氟酸 (HF)。 氟离子会永久损坏石英光纤电缆。

程序

1. 在主屏幕上,选择 Acclaro Pro 选项卡,然后选择 蛋白质 A280 Pro。

2. 配置任何期望设置选项,并选择 Save(保存)。

3. 将 1–2 µL 空白检测溶液移取至下基座,然后降下检测臂。

4. 选择 Blank(空白检测)并等待检测完成。

提示:如果自动空白检测设为 On(开启),空白检测将会在您降下检测臂后自动开始。

5. 抬起检测臂,用新的实验室抹布擦拭上下基座。

6. 移取 2 μL 样品溶液至基座。

7. 开始样品检测:

如果自动检测设为 On(开启),则降下检测臂;如果设为 Off(关闭),则降下检测臂并选择 Measure(检测)。

样品检测完成后,将显示光谱和报告的数值(请参阅下一个章节)。

8. 在您完成样品检测后,选择 End Experiment(结束实验)。

9. 抬起检测臂,用新的抹布擦拭上下基座。

 

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