• 在检测之前,将核酸样品隔离和纯化以去除杂质。 根据样品而定,杂质可以包括 DNA、RNA、游离核苷酸、蛋白质、一些缓冲液组分和染料。 有关详细信息,请参阅“制备样品”。
注 如果样品中存在盐酸胍、苯酚和 EDTA 等抽提试剂(即使是残留量), |
• 确保样品吸光度处于仪器的吸光度检测范围内。
• 使用用于再悬浮目标分析物的相同缓冲溶液进行空白检测。 空白检测溶液的 pH 值和离子强度应与分析物溶液相似。
• 运行空白检测周期评估缓冲溶液增加的吸光度。 如果缓冲液在处于或接近分析波长处(通常为 260 nm)表现出强吸光度,则您可能需要选择不同的缓冲液或 应用。 有关更多信息,请参阅“选择和进行空白检测”。
• 用于微体积检测:
–如果可能,在进行检测之前,应将高浓度或大分子样品(如基因组或 λ 噬菌体 DNA)加热至 63°C (145°F),然后轻轻(但彻底)混匀。 混合和转移样品时,避免引入气泡。
–遵循微体积检测的最佳实践。
–使用 1 - 2 µL 样品体积。 有关详细信息,请参阅“推荐的样品体积”。
• 对于比色皿检测(仅 NanoDrop UltraC 和 NanoDrop UltraC FL 仪器),请使用相容比色皿,并遵循比色皿检测的最佳实践。
• 检测微体积样品
• 基本仪器操作