基于吸光度的应用的检测限

样品类型

检测下限

检测上限

典型再现性a

dsDNA
(基座)

1.0 ng/µL(基座)

0.20 ng/µL(比色皿)

27,500 ng/µL(基座)

75 ng/µL(比色皿)

样品浓度处于 1.0 和 100 ng/µL 之间的样品为 ±1.0 ng/µL;
>100 ng/µL 的样品为 ±2%

ssDNA

0.66 ng/µL(基座)

0.13 ng/µL(比色皿)

18,150 ng/µL(基座)

49.5 ng/µL(比色皿)

样品浓度处于 0.66 和 100 ng/µL 之间的样品为 ±0.66 ng/µL;
>100 ng/µL 的样品为 ±2%

RNA(基座)

0.8 ng/µL(基座)

0.16 ng/µL(比色皿)

22,000 ng/µL(基座)

60 ng/µL(比色皿)

样品浓度处于 0.8 和 100 ng/µL 之间的样品为 ±0.8 ng/µL;
>100 ng/µL 的样品为 ±2%

DNA 基因芯片
(ssDNA)

0.66 ng/µL(基座)

0.13 ng/µL(比色皿)

495 ng/µL(基座)

49.5 ng/µL(比色皿)

样品浓度处于 0.66 和 100 ng/µL 之间的样品为 ±0.66 ng/µL;
>100 ng/µL 的样品为 ±2%

通过蛋白质 A280 应用检测的纯化 BSA

通过蛋白质 A280 应用检测的 IgG

0.03 mg/mL(基座)
0.006 mg/mL
(比色皿)

0.02 mg/mL(基座)
0.003 mg/mL
(比色皿)

820 mg/mL(基座)

402 mg/mL(基座)

±0.03 mg/mL
(0.03–10 mg/mL 样品);
>10 mg/mL 的样品为 ±2%

通过蛋白芯片的纯化 BSA

0.06 mg/mL(基座)

0.006 mg/mL
(比色皿)

19 mg/mL(基座)

0.06–10 mg/mL 样品为 ±0.06 mg/mL

蛋白质 BCA 法

0.125 mg/mL(20:1 试剂/样品体积)

0.02 mg/mL(1:1 试剂/样品体积)

2.0 mg/mL

0.20 mg/mL

整个范围的 2%

整个范围的 0.01 mg/mL

蛋白质 Lowry 法

0.2 mg/mL

1.5 mg/mL

整个范围的 2%

蛋白质 Bradford 法

100 µg/mL(30:1 试剂/样品体积)

15 µg/mL(1:1 试剂/样品体积)

1000 µg/mL

 

100 µg/mL

100–500 µg/mL 样品为 ±25 µg/mL
500–1000 µg/mL 样品为 ±5%

15–50 µg/mL 样品为 ±4 µg/mL
50–100 µg/mL 样品为 ±5%

蛋白质 Pierce 660 法

50 µg/mL(15:1 试剂/样品体积)

25 µg/mL(7.5:1 试剂/样品体积)

2000 µg/mL

 

1000 µg/mL

50–125 µg/mL 样品为 ±3 µg/mL
>125 µg/mL 样品为 ±2%

25–125 µg/mL 样品为 ±3 µg/mL
>125 µg/mL 样品为 ±2%

a基于五次重复 (SD=ng/µL; CV=%)

 

注  为了最小化高浓度样品导致的仪器错误,可进行稀释确保在以下吸光度范围内进行检测:

对于微体积检测,260 nm 处(核酸)或 280 nm 处(蛋白质)的最大吸光度应小于 62.5A。

对于使用 10 mm 光程比色皿的检测,260 nm(对于蛋白质,280 nm)处的最大吸光度应小于 1.5A,约为 75 ng/µL dsDNA。