使用蛋白芯片应用定量分析用于蛋白偶联物阵列的蛋白质和荧光染料,以及金属蛋白如血红蛋白,使用波长比。 此应用报告 280 nm 处检测的蛋白质浓度、A260/A280 吸光度比和浓度、以及检测的染料吸光度值,允许检测低至 0.2 皮摩尔/微升的染料浓度。 此信息对于评估用于下游应用的蛋白质/染料结合(标记程度)有用。
开始之前...
使用 NanoDrop Ultra 仪器进行基座检测之前,抬起仪器检测臂,然后清洁上下基座。 至少需使用新的实验室抹布擦拭基座。 有关详细信息,请参阅“清洁基座”。
注意 • 不要在仪器附近使用喷射器或喷雾瓶,因为液体会流入仪器并可能导致永久性损坏。 • 不要在基座上使用氢氟酸 (HF)。 氟离子会永久损坏石英光纤电缆。 |
程序
1. 在主屏幕上,选择 Proteins(蛋白质)选项卡,然后选择 Protein & Labels(蛋白芯片)。
2. 配置任何期望设置选项,并选择 Save(保存)。
提示:从预定义列表选择染料或使用添加用户自定义染料。
3. 如果使用 NanoDrop Ultrac或 NanoDrop Ultrac FL 型号,请选择正确的检测途径。
–使用比色皿时,从屏幕顶部下拉菜单选择 Cuvette(比色皿),而这将显示比色皿设置。 选择所需光程、搅拌速度和加热,然后关闭下拉菜单。
–使用基座进行检测时,确保 Pedestal(基座)设置为屏幕顶部的选定设置。
4. 将 1-2µL 的空白检测溶液移取至下基座,然后降下检测臂,或将空白检测比色皿插入比色皿架。
提示:如果使用比色皿,确保比色皿光路对准仪器光路。
5. 选择 Blank(空白检测)并等待检测完成。
提示:如果自动空白检测设为 On(开启),空白检测将会在您降下检测臂后自动开始。 (此选项不适用于比色皿检测。)
6. 抬起检测臂,用新的实验室抹布擦拭上下基座,或取下空白检测比色皿。
7. 将 2 µL 样品溶液移取至基座,然后降下检测臂,或将样品比色皿插入比色皿架。
8. 开始样品检测:
–基座:如果自动检测设为 On(开启),则降下检测臂;如果设为
Off(关闭),则降下检测臂并选择 Measure(检测)。
–比色皿:选择 Measure(检测)。
样品检测完成后,将显示光谱和报告值的数值(请参阅下一个章节)。
9. 在您完成样品检测后,选择 End Experiment(结束实验)。
10. 抬起检测臂,用新的抹布擦拭上下基座,或取下样品比色皿。
• 检测微体积样品
• 基本仪器操作