Limites de détection pour les applications fondées sur l’absorbance

Type d’échantillon

Limite inférieure de détection

Limite supérieure de détection

Reproductibilité typea

ARN
(socle)

0,8 ng/µl (socle)

0.16 ng/µl (cuvette)

22,000 ng/µl (socle)

60 ng/µl (cuvette)

± 2.0 ng/µl pour les concentrations d’échantillons comprises entre 2,0 et 100 ng/µl ;
± 2 % pour les échantillons > 100 ng/µl

ADN pour biopuce (microarray)
(ADNsb)

0,66 ng/µl (socle)

0,13 ng/µl (cuvette)

495 ng/µl (socle)

49,5 ng/µl (cuvette)

± 2,0 ng/µl pour les concentrations d’échantillons comprises entre 2,0 et 100 ng/µl ;
± 2 % pour les échantillons > 100 ng/µl

BSA purifiée, mesurée par Protein A280

IgG, mesurée par Protein A280

0,03 mg/ml (socle)
0,006 mg/ml (cuvette)

0,02 mg/ml (socle)
0,003 mg/ml (cuvette)

820 mg/ml (socle)

402 mg/ml (socle)

±0,10 mg/ml (pour les échantillons de 0,10 à 10 mg/ml) ;
± 2 % pour les échantillons > 10 mg/ml

BSA purifiée, mesurée par Proteins & Labels

0,06 mg/ml (socle)

0,006 mg/ml (cuvette)

19 mg/ml (socle)

±0,10 mg/ml pour les échantillons de 0,10 à 10 mg/ml

Protein BCA

0,125 mg/ml (volume de réactif/échantillon de 20:1)

0,02 mg/ml (volume de réactif/échantillon de 1:1)

2,0 mg/ml

0,20 mg/ml

2 % sur toute la plage

0,01 mg/ml sur toute la plage

Protein Lowry

0,2 mg/ml

1,5 mg/ml

2 % sur toute la plage

Protein Bradford

100 µg/ml (volume de réactif/échantillon de 30:1)

15 µg/ml (volume de réactif/échantillon de 1:1)

1000 µg/ml

 

100 µg/ml

± 25 µg/ml pour les échantillons de 100 à 500 µg/ml
± 5 % pour les échantillons de 500 à 1000 µg/ml

± 4 µg/ml pour les échantillons de 15 à 50 µg/ml
± 5 % pour les échantillons de 50 à 100 µg/ml

Protein Pierce 660

50 µg/ml (volume de réactif/échantillon de 15:1)

25 µg/ml (volume de réactif/échantillon de 7,5:1)

2000 µg/ml

 

1000 µg/ml

± 3 µg/ml pour les échantillons de 50 à 125 µg/ml
± 2 % pour les échantillons > 125 µg/ml

± 3 µg/ml pour les échantillons de 25 à 125 µg/ml
± 2 % pour les échantillons > 125 µg/ml

aSur la base de cinq répétitions (ET = ng/µl ; CV = %)

 

Remarque  Pour réduire le risque d’erreurs de l’instrument causées par des échantillons très concentrés, assurez-vous de diluer vos échantillons afin que leurs mesures se situent entre ces limites d’absorbance :

Pour les mesures de micro-volumes, l’absorbance maximale à 260 nm (pour les acides nucléiques) ou à 280 nm (pour les protéines) doit être inférieure à 62,5 A.

Pour les mesures en cuvettes de 10 mm de trajet optique, l’absorbance maximale à 260 nm (ou 280 nm pour les protéines) doit être inférieure à 1,5 A, ce qui correspond à environ 75 ng/µl d’ADNdb.