Contrôle des performances de fluorescence
Procédez à un contrôle des performances de fluorescence tous les 6 mois pour confirmer que l’exécution et la précision des mesures de fluorescence sont conformes aux spécifications. Ce module n’est disponible que sur les instruments NanoDrop Ultra FL et NanoDrop Ultrac FL.
Fournitures nécessaires
• Kit d’analyse FL-1 Fluorescence Verification Assay (CHEM-FL1-KIT)
–Solution de réactif blanc
–Réactif de fluorescence vert
–Réactif de fluorescence rouge lointain
• Tubes en plastique de 0,2 ml, à bouchon plat ou similaire
• Lingettes non pelucheuses pour laboratoire
• Eau déionisée (H2O DI)
• Pipette de précision étalonnée (0 à 2 µl)
• Gants de laboratoire
• Mélangeur Vortex
• Mini-centrifugeuse
Avant de commencer
Préparez trois tubes ambrés en plastique stériles pour chacun des trois réactifs fournis dans le kit FL-1 Fluorescence Verification (réactif blanc, fluorescent vert et fluorescent rouge lointain) et étiquetez-les « Blanc », « Étalon vert 2 » et « Étalon rouge lointain 2 ».
Préparez deux tubes ambrés en plastique stériles supplémentaires pour les dilutions du réactif fluorescent vert et du réactif fluorescent rouge lointain et étiquetez-les « Étalon vert 1 » et « Étalon rouge lointain 1 ».
Tube Blanc
–Ajoutez 50 µl de réactif blanc au tube portant l’étiquette « Blanc ».
Tube Étalon vert 2
–Ajoutez 22 µl de réactif fluorescent vert.
Tube Étalon rouge lointain 2
–Ajoutez 30 µl de réactif fluorescent rouge lointain.
Tube Étalon vert 1
–Transférez 18 µl de réactif blanc prélevé dans le tube portant l’étiquette « Blanc ».
–Ajoutez-y 2 µl d’étalon vert 2 et mélangez au vortex pendant 3 à 5 secondes.
–Centrifugez brièvement. Votre échantillon de réactif fluorescent vert dilué à 1/10 est prêt.
Tube Étalon rouge lointain 1
–Transférez 10 µl de réactif blanc prélevé dans le tube portant l’étiquette « Blanc ».
–Ajoutez-y 10 µl d’étalon rouge lointain 2 et mélangez au vortex pendant 3 à 5 secondes.
–Centrifugez brièvement. Votre échantillon de réactif fluorescent rouge lointain dilué à 1/2 est prêt.
Exécuter un contrôle des performances de fluorescence
1. Sur la page d’accueil, sélectionnez l’icône des diagnostics puis Fluorescence Performance Check. (contrôle des performances de fluorescence).
2. Un message apparaît indiquant que le test nécessite l’utilisation du kit FL-1 Fluorescence Verification FL-1 ; appuyez sur Run (exécuter).
3. Assurez-vous que le socle est propre et appuyez sur Blank (effectuer le blanc).
4. Pipetez 2 µl du réactif de blanc prélevé dans le tube de blanc sur le socle inférieur.
a.Si le mode Auto-Measure (mesure automatique) est activé , abaissez le bras.
b.Si le mode Auto-Measure (mesure automatique) est désactivé, abaissez le bras et sélectionnez Measure (mesurer).
5. Relevez le bras et nettoyez les deux socles avec une nouvelle lingette de laboratoire.
6. Répétez les étapes 4 et 5 pour un total de cinq mesures.
7. Pipetez 2 µl de réactif fluorescent vert dilué prélevé dans le tube « Étalon vert 1 » sur le socle inférieur.
a.Si le mode Auto-Measure (mesure automatique) est activé, abaissez le bras.
b.Si le mode Auto-Measure (mesure automatique) est désactivé, abaissez le bras et sélectionnez Measure (mesurer).
8. Relevez le bras et nettoyez les deux socles avec une nouvelle lingette de laboratoire.
9. Répétez les étapes 7 et 8 pour un total de cinq mesures.
10. Pipetez 2 µl de réactif fluorescent vert prélevé dans le tube « Étalon vert 2 » sur le socle inférieur.
a.Si le mode Auto-Measure (mesure automatique) est activé, abaissez le bras.
b.Si le mode Auto-Measure (mesure automatique) est désactivé, abaissez le bras et sélectionnez Measure (mesurer).
11. Relevez le bras et nettoyez les deux socles avec une nouvelle lingette de laboratoire.
12. Répétez les étapes 10 et 11 pour un total de cinq mesures.
13. Pipetez 2 µl de réactif blanc prélevé dans le tube Blanc sur le socle inférieur.
a.Si le mode Auto-Measure (mesure automatique) est activé, abaissez le bras.
b.Si le mode Auto-Measure (mesure automatique) est désactivé, abaissez le bras et sélectionnez Measure (mesurer).
14. Relevez le bras et nettoyez les deux socles avec une nouvelle lingette de laboratoire.
15. Répétez les étapes 13 et 14 pour un total de cinq mesures.
16. Pipetez 2 µl de réactif fluorescent rouge lointain dilué prélevé dans le tube « Étalon rouge lointain 1 » sur le socle inférieur.
a.Si le mode Auto-Measure (mesure automatique) est activé, abaissez le bras.
b.Si le mode Auto-Measure (mesure automatique) est désactivé, abaissez le bras et sélectionnez Measure (mesurer).
17. Relevez le bras et nettoyez les deux socles avec une nouvelle lingette de laboratoire.
18. Répétez les étapes 16 et 17 pour un total de cinq mesures.
19. Pipetez 2 µl de réactif fluorescent rouge lointain prélevé dans le tube « Étalon rouge lointain 2 » sur le socle inférieur.
a.Si le mode Auto-Measure (mesure automatique) est activé, abaissez le bras.
b.Si le mode Auto-Measure (mesure automatique) est désactivé, abaissez le bras et sélectionnez Measure (mesurer).
20. Relevez le bras et nettoyez les deux socles avec une nouvelle lingette de laboratoire. Répétez les étapes 19 et 20 pour un total de cinq mesures.
Interpréter les résultats du contrôle des performances de fluorescence
Le résultat global du test sera affiché en haut de l’écran sous forme d’un symbole « Pass » vert (réussite) ou « Fail » rouge (échec).
Si les résultats ne sont pas conformes aux spécifications, répétez la procédure avec de nouvelles dilutions des réactifs FL-1.
Si les résultats ne répondent pas aux spécifications après la deuxième tentative, contactez-nous.