Calculs

Un algorithme d’ajustement de courbe nécessitant deux étalons est utilisé pour calculer les données de concentration. Les analyses de fluorescence NanoDrop Ultra dsDNA et RNA s’appuient sur un tracé de Hill modifié pour générer des données de concentration à partir de la relation entre les deux étalons utilisées.

Les données de concentration dérivées des applications fondées sur la fluorescence sont calculées à partir de la relation entre les deux étalons utilisés pour créer la courbe d’étalonnage.

Valeurs mesurées

 

RFU de l’échantillon. La valeur RFU d’un échantillon  est la mesure de ses unités de fluorescence relatives, qui permet de quantifier l’intensité de la fluorescence émise par l’échantillon.

RFU n. 1. Unités de fluorescence relatives relevées dans le premier réplicat de l’étalon.

RFU n. 2. Unités de fluorescence relatives relevées dans le deuxième réplicat de l’étalon.

RFU n. 3. Unités de fluorescence relatives relevées dans le troisième réplicat de l’étalon.

Valeurs rapportées

 

Concentration d’acides nucléiques.

Rapportée dans l’unité sélectionnée (c.-à-d. ng/µl, µg/ul ou µg/ml). La RFU de l’échantillon est utilisée pour extrapoler la concentration de cet échantillon à partir d’une courbe d’étalonnage (courbe de Hill modifiée).

Concentration initiale en acides nucléiques.

La concentration mesurée et le facteur de dilution sont utilisés pour calculer la concentration de l’échantillon initial, avant qu’il ne soit ajouté à la réaction.

Facteur de dilution.

Rapport entre le volume de l’échantillon initial et le volume total dans le tube de test.

RFU moyenne de l’étalon.

Moyenne des RFU mesurées sur tous les réplicats d’un étalon.

Nombre de réplicats.

Nombre de mesures répétées pour chaque étalon.

LED d’excitation.

Source de la lumière d’excitation utilisée pendant la mesure.