Fluorophor markierte Proben messen

Verwenden Sie die Fluorometer-Anwendung, um die Fluoreszenz zu messen, die von einer Vielzahl von Proben, die mit Fluorophor markiert wurden, abgegeben wird. Ähnlich wie bei den Anwendungen dsDNA-Fluoreszenz und RNA-Fluoreszenz wird auch hier eine generierte Standardkurve zur Bestimmung der Konzentration der gemessenen Proben verwendet. Diese Anwendung ermöglicht die Verwendung zusätzlicher Assays jenseits der NanoDrop Ultra BR- und HS-Fluoreszenzassays.

 

Vor Beginn...

Bevor Sie die Messungen mit dem NanoDrop Ultra-Gerät durchführen, stellen Sie den Gerätearm auf und reinigen Sie die oberen und unteren Messplätze. Sie sollten die Messplätze wenigstens mit einem frischen Labortuch abwischen. Weitere Informationen finden Sie unter „Reinigung der Messplätze“.

NOTICE    

Verwenden Sie keine Spritz- oder Sprühflasche an oder in der Nähe des Instruments, da Flüssigkeiten in das Gerät eindringen und permanente Schäden verursachen können.

Verwenden Sie an den Messplätzen keine Fluorwasserstoffsäure (HF). Fluoridionen schädigen die Quarzglasfaserkabel dauerhaft.

Vorbereitung von Proben- und Standards

Anweisungen zur Vorbereitung der Teststandards und Proben finden Sie in der Anleitung, die dem von Ihnen verwendeten Test beiliegt.

Weitere Arbeiten mit Standardkurven Optionen beim Erstellen einer Standardkurve finden Sie unter „Arbeiten mit Standardkurven“.

Messen Sie Fluorophor-markierte Standards und Proben mithilfe der Fluoreszenz

1. Wählen Sie auf dem Startbildschirm die Registerkarte Fluorescence und dann Fluorometer. aus

2. Wählen Sie eine der Optionen für die Anregungs-LED (blau oder rot).

Blue-Red.png

 

3. Passen Sie bei Bedarf eine der setup options (Einstellungsoptionen) an und klicken Sie auf Save (Speichern).

4. Standards messen (Schritt überspringen, wenn eine vorhandene Standardkurve verwendet wird):

a.Pipettieren Sie 2 µl der Probe aus dem Teströhrchen auf den unteren Messplatz und senken Sie den Gerätearm ab. Die Referenz sollte keinen der gesuchten Analyten enthalten.

Wenn Auto-Measure (automatische Messung) auto-messung OFF and ON ist Auto-meas-off-ico00135.png, senken Sie den Arm und wählen Sie Measure (Messen).um die Messung zu starten.

Wenn Auto-Measure (automatische Messung) auf On (Ein) steht Auto-meas-on-ico00136.png, beginnt die Messung automatisch, sobald der Gerätearm abgesenkt wird.

Note  Verwenden Sie für jede Messung immer ein frisches 2 µl-Aliquot.

b.Entfernen Sie nach Abschluss der Messung die Probe mit einem trockenen Labortuch vom oberen und unteren Messplatz.

c.Wenn die Einstellung für Wiederholungen größer als 1 ist, wiederholen Sie die Messung, bis alle Wiederholungen abgeschlossen sind.

Wiederholen Sie die obigen Unterschritte für Standard Nr. 1, einschließlich zusätzlicher Wiederholungsmessungen.

Wenn sowohl die Standards als auch alle Wiederholungen gemessen wurden, wird eine Meldung mit Optionen zum erneuten Messen der Standards oder zum Beginn der Probenmessung angezeigt.

Wenn Sie die Messung der Standards beendet haben, wählen Sie  Measure Samples (Proben messen).

5. Proben messen:

a.Geben Sie die Proben-ID oben auf dem Bildschirm ein oder bearbeiten Sie sie, indem Sie das Feld auswählen und einen neuen Probennamen eingeben.

b.Pipettieren Sie 2 µl der Probe aus dem Teströhrchen auf den unteren Messplatz und senken Sie den Gerätearm ab.

Wenn Auto-Measure (automatische Messung) deaktiviert (off) ist Auto-meas-off-ico00137.png, senken Sie den Arm und wählen Sie Measure (Messen).um die Messung zu starten.

Wenn Auto-Measure (automatische Messung) auf On (Ein) steht Auto-meas-on-ico00138.png, beginnt die Messung automatisch, sobald der Gerätearm abgesenkt wird.

Note  Verwenden Sie für jede Messung immer ein frisches 2 µl-Aliquot.

c.Wenn die Probenmessung beendet ist, werden das Spektrum und die gemessenen Werte angezeigt (siehe nächster Abschnitt).

d.Entfernen Sie nach Abschluss der Messung die Probe mit einem trockenen Labortuch vom oberen und unteren Messplatz.

e.Wiederholen Sie diese Teilschritte, um alle verbleibenden Proben zu messen (folgen Sie den Anweisungen auf dem Bildschirm).

f.Wenn das Messen der Proben beendet ist, tippen Sie auf End Experiment (Experiment beenden).

6. Stellen Sie den Gerätearm auf und reinigen Sie beide Messplätze mit einem frischen Labortuch.

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