Messung von Protein E280

Verwenden Sie die Anwendung Protein A280, um gereinigte Proteinproben zu quantifizieren, die Aminosäuren wie Tryptophan oder Tyrosin, oder Cys-Cys-Disulfatbindungen, die eine Extinktion bei 280nm aufweisen. Diese Anwendung meldet die bei 280 nm gemessene Proteinkonzentration und ein Extinktionsverhältnis (E260/E280). Auch eine Einzelpunkt-Basislinienkorrektur kann vorgenommen werden. Für diese Anwendung ist keine Standardkurve erforderlich.

Vor Beginn...

Heben Sie den Gerätearm an und reinigen Sie die obere und untere Baseline, bevor Sie Baseline-Messungen mit einem der BioDrop Ultra-Instrumente durchführen. Wischen Sie die Messplätze mindestens mit einem neuen Labor-Wischtuch ab. Weitere Informationen finden Sie unter Reinigung der Messplätze.

Note  Wenn Ihre Proben hauptsächlich Peptidbindungen und wenige oder keine Aminosäuren  enthalten, verwenden Sie die Protein E205-Anwendung statt Protein E280 Pro.

NOTICE    

Verwenden Sie keine Spritzen oder Sprühflasche auf oder in der Nähe des Geräts, da Flüssigkeiten in das Gerät fließen und dauerhafte Schäden verursachen können.

Verwenden Sie an den Messplätzen keine Fluorwasserstoffsäure (HF). Fluoridionen schädigen die Quarzglasfaserkabel dauerhaft.

Verfahren

1. Wählen Sie auf dem Startbildschirm die Registerkarte Proteins (Proteine) und dann Protein A280 (Protein E205).

2. Passen Sie bei Bedarf eine der setup options (Einstellungsoptionen) an und klicken Sie auf Save (Speichern).

3. Wenn Sie ein NanoDrop Ultrac- oder NanoDrop Ultrac FL-Modell verwenden, wählen Sie den richtigen Messpfad aus.

Wenn Sie eine Küschöpfe verwenden, wählen Sie im Dropdown-Menü am oberen Rand des Bildschirms die Option aus Küverhalten, um die Kündigungseinstellungen anzuzeigen.
Wählen Sie die gewünschte Schichtdicke, Rührgeschwindigkeit und Heizleistung aus und schließen Sie dann das Dropdown-Menü.

Wenn Sie den Messplatz für Messungen verwenden, lassen Sie Pedestal (Messplatz) als ausgewählte Einstellung oben auf dem Bildschirm.

4. Pipettieren Sie 1–2 µl der Leerprobenlösung auf den unteren Messplatz und senken Sie den Gerätearm ab, oder setzen Sie die Leerprobenküvette in den Küvettenhalter ein.

 

Tipp: Wenn Sie eine Küvette verwenden, achten Sie darauf, den Lichtweg der Küvette mit dem Lichtweg des Geräts abzugleichen.

5. Wählen Sie Blank (Leerprobe) und warten Sie, bis die Messung abgeschlossen ist.

Tipp: Wenn Auto-Blank (Auto-Leerprobe) aktiviert ist, startet die Leerprobenmessung automatisch, nachdem Sie den Gerätearm gesenkt haben. (Diese Option ist für Küvettenmessungen nicht verfügbar.)

6. Stellen Sie den Gerätearm auf und reinigen Sie beide Messplätze mit einem frischen Labor-Wischtuch oder entfernen Sie die Leerwertküvette.

7. Pipettieren Sie 2–2 µl der Probenlösung auf den Messplatz oder setzen Sie die Küvette mit der Probe in den Küvettenhalter ein.

8. Starten Sie die Probenmessung:

Messplatz: Wenn Auto-Measure (Auto-Messung) auf On (Ein) gesetzt ist, senken Sie den Gerätearm ab; wenn Auto-Messung auf Off (Aus) gesetzt ist, senken Sie den Gerätearm ab und tippen Sie auf Measure (Messen).

Küvette: Tippen Sie auf Measure (Messen).

Wenn die Probenmessung abgeschlossen ist, werden das Spektrum und die berichteten Werte angezeigt (siehe nächster Abschnitt).

9. Wenn Sie mit dem Messen der Proben fertig sind, wählen Sie End Experiment (Versuch beenden).

10. Stellen Sie den Gerätearm auf und reinigen Sie beide Messplätze mit einem frischen Wischtuch oder entfernen Sie die Probenküvette.

 

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