Einstellungen

Diese Einstellungen stehen zum Anlegen benutzerdefinierter Methoden zur Verfügung.

Einstellung

Verfügbare Optionen

Ergebnis

Geben Sie einen beschreibenden Namen für das berechnete Konzentra­tionsergebnis ein (z. B. „MTT-Assay“) und verwenden Sie die nebenstehende Dropdown-Liste, um die entsprechende Einheit auszuwählen. Der Ergebnis­name erscheint als Spaltenüberschrift des berichteten Konzentrationswerts.

Messbereich

Wählen Sie den Spektralbereich aus, in dem diese Methode Daten erfasst.
Verfügbare Optionen:

Nur Ultraviolett (190 nm – 350 nm)

Nur sichtbares Licht (350 nm – 850 nm)

Ultraviolett und sichtbar (190 nm – 850 nm)

Benutzerdefiniert (Anfangs- und Endpunkt in Nanometern angeben)

Anmerkungen:

Wenn die Basislinienkorrektur und/oder die Analysenwellenlängenkorrek­tur verwendet werden, stellen Sie sicher, dass der ausgewählte Spektral­bereich die von Ihnen angegebene Wellenlänge der Basislinienkorrektur und/oder die Wellenlänge für die Analysenkorrektur umfasst.

Bei Mikrovolumen-Extinktionsmessungen und Messungen mit nicht stan­dardisierten Küvetten (andere Küvetten als 10-mm-Küvetten) werden die Spektren auf eine 10-mm-äquivalente Schichtdicke normiert.

Analysenwellenlängenkor­rektur

Verwenden Sie diese Option, um die Extinktionskorrektur nur bei der Analysewellenlänge anzugeben. Verfügbare Optionen:

Keine. Keine Korrektur bei der Analysewellenlänge.

Einzelpunkt. Geben Sie die Wellenlänge für die Analysekorrektur ein. (Der Extinktionswert bei der angegebenen Wellenlänge für die Analysenkorrektur wird vom Extinktionswert bei der Analysewellenlänge subtrahiert. Der korrigierte Wert wird zur Berechnung der Probenkonzentration verwendet.)

Schräge Basislinie. Geben Sie zwei Wellenlängen ein, die die schräge Basislinie für die Analysekorrektur definieren. (Der Extinktionswert der schrägen Basislinie bei der angegebenen Analysewellenlänge wird vom Extinktionswert bei der Analysewellenlänge subtrahiert. Der korrigierte Wert wird zur Berechnung der Probenkonzentration verwendet.)

Faktor oder Extinktion­skoeffizient bei 1 cm Schichtdicke (nur For­mel-Methoden)

Geben Sie an, ob der Faktor oder der Extinktionskoeffizient zur Berechnung des Konzentrationsergebnisses verwendet werden soll:

 

Benutzerdefinierter Faktor. Geben Sie den Faktor für 1 cm Schichtdicke ein und verwenden Sie die nebenstehende Dropdown-Liste, um die entsprechende Unit (Einheit) auszuwählen. Die folgende Gleichung zeigt, wie der Faktor zur Berechnung der Probenkonzentration verwendet wird:

c = (A * f) / b

wobei:
c = Analytkonzentration
A = Extinktion in Extinktionseinheiten (A)
f = Faktor (typischerweise 1/e, wobei e = wellenlängenabhängiger molarer Absorptionskoeffizient oder Extinktionskoeffizient)
b = Schichtdicke in cm (zum Zeitpunkt der Messung bestimmt, dann auf eine 10 mm (1 cm)-äquivalente Schichtdicke normiert)

Extinktionskoeffizient und Molekularmasse. Geben Sie den Extinktionskoeffizienten für 1 cm Schichtdicke ein und verwenden Sie die nebenstehende Dropdown-Liste, um die entsprechende Unit (Einheit) auszuwählen. Die folgende Gleichung zeigt, wie der Extinktionskoeffizient zur Berechnung der Probenkonzentration verwendet wird:

c = A / (e * b)

wobei:
c = Analytkonzentration
A = Extinktion in Extinktionseinheiten (A)
e = wellenlängenabhängiger molarer Absorptionskoeffizient (oder Extinktionskoeffizient)
b = Schichtdicke in cm (zum Zeitpunkt der Messung bestimmt, dann auf eine 10 mm (1 cm)-äquivalente Schichtdicke normiert)

 

Anmerkungen:

Konsultieren Sie die Produktliteratur, um Informationen zu Faktoren und Extinktionskoeffizienten für spezifische Materialien zu erhalten.

Um eine Methode einzurichten, die nur Absorptionsmessungen meldet, wählen Sie Factor (Faktor) oder Extinction Coefficient (Extinktionskoeffizient) aus, wobei der Faktor oder Extinktionskoeffizient auf „1“ gesetzt wird.

Wenn die angegebene Einheit für den Faktor oder den Extinktionskoeffizienten auf der Masse (z. B. mg/ml) und die angegebene Einheit für das berechnete Ergebnis auf der Molarität (z. B. pmol/µl) basiert oder umgekehrt, geben Sie molecular weight (Molekulargewicht) ein und verwenden Sie die nebenstehende Dopdown-Liste, um die entsprechende Unit (Einheit) auszuwählen.

Standards (nur Standardkurven-Methoden)

Definieren Sie die Standards:

 

Geben Sie den Namen und die Analytkonzentration jedes Standards sowie bei Bedarf eine Referenz ein:

Je nach der Einstellung von Curve Type (Kurventyp) kann eine Standardkurve unter Verwendung von zwei oder mehr Standards generiert werden. (Die Software ermöglicht eine Referenz und bis zu 15 Standards.)

Alle Referenz- und Standardlösungen sollten im gleichen Puffer vorliegen, der zum Resuspendieren der Proben verwendet wurde, sowie im gleichen Volumen an Reagenz, das den Proben zugesetzt wurde.

Der erste Standard kann als Referenzmessung dienen. Die Referenzlösung sollte keinen der Analyten von Interesse enthalten. (Die Referenzmessung ist nicht dasselbe wie eine Leerwertmessung.)

Die Konzentrationswerte der Standards können in beliebiger Reihenfolge eingegeben werden, aber die Standards müssen in der Reihenfolge gemessen werden, in der sie eingegeben wurden; die bewährte Praxis schreibt jedoch vor, dass die Standards von der niedrigsten bis zur höchsten Konzentration des Standard-Analyt-Stamms gemessen werden.

Der Konzentrationsbereich der Standards muss den dynamischen Bereich des Assays und den erwarteten Bereich der unbekannten Proben abdecken. Die Analytkonzentrationen der Probe werden nicht über die Konzentration des höchsten Standards hinaus extrapoliert.

 

Wählen Sie den Kurveanpassungstyp.

Geben Sie die Art der Gleichung an, die zur Erstellung der Standardkurve aus Standardkonzentrationswerten verwendet wird. Verfügbare Optionen:

Linear: Zieht die Gerade der kleinsten Quadrate durch alle gemessenen Standards (erfordert eine Referenzmessung und mindestens einen Standard). Eine Gerade durch Null ist ähnlich, jedoch mit der Einschränkung, dass die Linie durch den Ursprung (0,0) verläuft

Interpolation: Zeichnet eine Reihe von geraden Linien, um alle gemessenen Standards zu verbinden (erfordert eine Referenzmessung und mindestens einen Standard)

Polynomfunktion 2. Grades: Ermittelt das Polynom 2. Grades der kleinsten Quadrate unter Verwendung aller gemessenen Standards (erfordert eine Referenzmessung und mindestens zwei Standards). Polynom 2. Grades durch Null ist ähnlich, aber mit der Einschränkung, dass die Gerade durch den Ursprung (0,0) verläuft

Polynomfunktion 3. Grades: Ermittelt das Polynom 3. Grades der kleinsten Quadrate unter Verwendung aller gemessenen Standards (erfordert eine Referenzmessung und mindestens drei Standards). Polynom 3. Grades durch Null ist ähnlich, aber mit der Einschränkung, dass die Gerade durch den Ursprung (0,0) verläuft

Analysewellenlänge
(nur Standardkur­ven-Methoden)

Überwachen der Extinktion bei einer bestimmten Wellenlänge (geben Sie die Wellenlänge in Nanometern ein).

Hinweis: Die angegebene Wellenlänge muss innerhalb des ausgewählten Messbereichs liegen.

Die Messergebnisse oder die Konzentration werden automatisch unter Ver­wendung des Extinktionswerts bei der angegebenen Wellenlänge und unter Anwendung des ausgewählten Methodentyps (Faktor oder Standardkurve) berechnet.

Baseline correction (Basislinienkorrektur)

Wählen Sie diese Option aus, um den durch Lichtstreuung von Partikeln verursachten Offset zu korrigieren, indem die Extinktion an einem bestimmten Punkt der Basislinie subtrahiert wird. Geben Sie dann die Wellenlänge für die Basislinienkorrektur an.

Hinweis: Die Software subtrahiert den Extinktionswert bei der angegebenen Basislinienkorrektur-Wellenlänge von den Extinktionswerten aller Wellenlängen im Probenspektrum. Daher ist die Extinktion des Probenspektrums bei einer bestimmten Wellenlänge der Basislinienkorrektur gleich Null.

Automatisierte Schichtdicke

Betrifft nur Mikrovolumenmessungen.

Wenn die automatisierte Schichtdicke aktiviert ist, wählt die Software die optimale Schichtdicke (zwischen 1,0 m und 0,03 mm) basierend auf der Extinktion der Probe bei der Analysewellenlänge aus. Wenn zum Beispiel die Extinktion der Probe bei der Analysewellenlänge kleiner oder gleich 12,5 ist (10 mm-äquivalente Schichtdicke), wird die optimale längere Schichtdicke verwendet. Wenn die Probenextinktion größer als 12,5 ist, wird die optimale kürzere Schichtdicke verwendet. Empfohlen für Proben, die bei der Analysewellenlänge stark absorbierend sind. (Diese Option kann zu einer verringerten Empfindlichkeit führen, wenn die Probenspektren einen großen Extinktionsspitzenwert aufweisen, der nicht bei der Analysewellenlänge liegt.)

Hinweis: Wenn die Analysewellenlänge zwischen 190 nm und 219 nm liegt, wird die optimale längere Schichtdicke verwendet, wenn die Extinktion der Probe kleiner oder gleich 10 ist (10 mm-äquivalente Schichtdicke ), und die optimale kürzere Schichtdicke wird verwendet, wenn die Extinktion der Probe größer als 10 ist.

Wenn die automatisierte Schichtdicke deaktiviert ist, verwendet die Software unabhängig von der Extinktion der Probe eine Schichtdicke von 1 mm. Dies kann bei Proben mit hoher Extinktion (z. B. ~15 A bei 10 mm-äquivalenter Schichtdicke) zu einer Detektorsättigung führen (was zu gezackten Spitzen führt).

Formeltabelle (optional)

Verwenden Sie die Formeltabelle, um zusätzliche berichtete Ergebnisse, wie z. B. ein Reinheitsverhältnis, für jede Probe anzugeben.

 

Verfügbare Optionen:

Predefined (Vordefiniert). Wählen Sie aus einer Liste vordefinierter Formeln, die unverändert verwendet oder bearbeitet werden können, und wählen Sie Save (Speichern). Die vordefinierte Formel ist in der Formeltabelle aufgeführt.

+Formula (+Formel). Erstellen Sie eine Formel für die aktuelle Methode. Verfügbare Optionen:

Formula Name (Formelname). Geben Sie einen Namen für die Formel ein. Nach einer Messung wird der Name in den Bildschirmen Data Table (Datentabelle) und Sample Details (Probendetails) angegeben.

Equation (Gleichung). Geben Sie eine gültige Formel ein (Regeln und Beispiele finden Sie weiter unten). Nach einer Messung wird der gemessene oder berechnete Wert in den Bildschirmen Data Table (Datentabelle) und Sample Details (Probendetails) angegeben.

Unit (Einheit). Wählen Sie aus einer Dropdown-Liste mit verfügbaren Einheiten die korrekte Einheit für das berichtete Ergebnis aus. Nach einer Messung wird die Einheit in den Bildschirmen Data Table (Datentabelle) und Sample Details (Probendetails) angegeben.

Delete (Löschen). Löschen Sie die ausgewählte Formel aus der aktuellen Methode trash.png.

Formelregeln

Benutzerdefinierte Formeln können die folgenden Operatoren und Funktionen enthalten:

Path(). Gibt die Schichtdicke der Probe in cm zurück.

A(nm). Gibt die Extinktion der Probe bei der angegebenen Wellenlänge zurück (geben Sie z. B. E(650) ein, um die gemessene Extinktion bei 650 nm zu Ihrer Gleichung hinzuzufügen).

Operators: + (addier), - (subtrahieren), * (multiplizieren), / (dividieren).

Funktionen: Log(x), Pow(x,y).

Anmerkungen: Beachten Sie diese zusätzlichen Regeln für alle Sprachen:

Verwendung des Satzendzeichens „.“ Dezimaltrennzeichen für Gleitkomma- und doppelte Gleitkommazahlen.

Verwenden des Kommas „“, des Listentrennzeichens (z. B. „POW(2,8)“).

Verwenden Sie bei großen Zahlen keine Kommas als Gruppentrennzeichen (geben Sie beispielsweise 1000 statt 1.000 ein).