Messen mit Oligo-DNA-Pro oder Oligo-RNA-Pro

Verwenden Sie die Anwendungen Oligo DNA Pro und Oligo RNA Pro, um Oligonukleotide, die bei 260 nm absorbieren, mit höherer Genauigkeit bei höheren Konzentrationen (> 62,5 E) zu quantifizieren. Die molaren Extinktionskoeffizienten werden automatisch auf der Grundlage der benutzerdefinierten Basensequenz der Probe berechnet. Diese Anwendungen messen die Nukleinsäurekonzentration und zwei Extinktionsverhältnisse (E260/E280 und E260/E230). Es kann auch eine Einzelpunkt-Basislinienkorrektur verwendet werden.

 

 

 

Vor Beginn...

Bevor Sie die Messungen mit dem NanoDrop Ultra-Gerät durchführen, stellen Sie den Gerätearm auf und reinigen Sie die oberen und unteren Messplätze. Sie sollten die Messplätze wenigstens mit einem frischen Labortuch abwischen. Weitere Informationen finden Sie unter „Reinigung der Messplätze“.

Note  Wenn das Oligonukleotid modifiziert wurde, z. B. mit einem Fluorophor-Farbstoff, erkundigen Sie sich bei dem Oligo-Hersteller, ob die Modifikation zu einer Extinktion bei 260 nm beiträgt. Wenn dies der Fall ist, empfehlen wir die Verwendung der Mikroarray-Anwendung zur Quantifizierung der Nukleinsäurekonzentration. Die Microarray-Anwendung enthält eine Korrektur, um eventuelle Extinktionsbeiträge aufgrund des Farbstoffs aus dem Oligo-Quantifizierungsergebnis zu entfernen.

NOTICE    

Verwenden Sie keine Spritz- oder Sprühflasche an oder in der Nähe des Instruments, da Flüssigkeiten in das Gerät eindringen und permanente Schäden verursachen können.

Verwenden Sie an den Messplätzen keine Fluorwasserstoffsäure (HF). Fluoridionen schädigen die Quarzglasfaserkabel dauerhaft.

 

Verfahren

1. Wählen Sie auf dem Startbildschirm die Registerkarte Acclaro Pro und dann je nach Bedarf entweder Oligo DNA Pro oder Oligo RNA Pro aus.

2. Passen Sie bei Bedarf eine der setup options (Einstellungsoptionen) an und klicken Sie auf Save (Speichern).

3. Pipettieren Sie 1–2 µl Leerprobenlösung auf den unteren Messplatz und senken Sie den Gerätearm ab.

4. Wählen Sie Blank (Leerprobe) und warten Sie, bis die Messung abgeschlossen ist.

Tipp: Wenn Auto-Blank (Auto-Messung)  auf On (Ein) steht, beginnt die Leerprobenmessung automatisch, nachdem Sie den Gerätearm gesenkt haben.

5. Stellen Sie den Arm auf und reinigen Sie beide Messplätze mit einem frischen Labortuch.

6. Geben Sie 1–2 µl Probenlösung auf den Messplatz.

7. Probenmessung starten:

Wenn Auto-Measure (Auto-Messung)  auf On (ein) steht, senken Sie den Gerätearm; wenn Auto-Measure (Auto-Messung) auf Off Aus) steht, senken Sie den Gerätearm und tippen dann auf Measure.

Wenn die Probenmessung beendet ist, werden das Spektrum und die gemessenen Werte angezeigt (siehe nächster Abschnitt).

8. Wenn Sie mit dem Messen der Proben fertig sind, wählen Sie End Experiment (Versuch beenden).

9. Stellen Sie den Gerätearm auf und reinigen Sie beide Messplätze mit einem frischen Labortuch.

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