Nachweisgrenzen für extinktionsbasierte Anwendungen

Probentyp

Untere Nachweisgrenze

Obere Nachweisgrenze

Typische Reproduzierbarkeita

dsDNA
(Messplatz)

1,0 ng/µl (Messplatz)

0,20 ng/µl (Küvette)

27.500 ng/µl (Messplatz)

75 ng/µl (Küvette)

±1,0 ng/µl für Probenkonzentrationen zwischen 1,0 und 100 ng/µl;
± 2% für Proben > 100 ng/µl

ssDNA

0,66 ng/µl (Messplatz)

0,13 ng/µl (Küvette)

18.150 ng/µl (Messplatz)

49,5 ng/µl (Küvette)

±0,66 ng/µl für Probenkonzentrationen zwischen 0,66 und 100 ng/µl;
± 2% für Proben > 100 ng/µl

RNA
(Messplatz)

0,8 ng/µl (Messplatz)

0,16 ng/µl (Küvette)

22.000 ng/µl (Messplatz)

60 ng/µl (Küvette)

±0,8 ng/µl für Probenkonzentrationen zwischen 0,8 und 100 ng/µl;
± 2% für Proben > 100 ng/µl

DNA-Microarray
(ssDNA)

0,66 ng/µl (Messplatz)

0,13 ng/µl (Küvette)

495 ng/µl (Messplatz)

49,5 ng/µl (Küvette)

±0,66 ng/µl für Probenkonzentrationen zwischen 0,66 und 100 ng/µl;
± 2% für Proben > 100 ng/µl

Aufgereinigte BSA durch Protein E280

IgG durch Protein E280

0,03 mg/ml (Messplatz)
0,006 mg/ml (Küvette)

0.02 mg/ml (Messplatz)
0,003 mg/ml (Küvette)

820 mg/ml (Messplatz)

402 mg/ml (Messplatz)

±0,03 mg/ml (für Proben mit 0,03–10 mg/ml);
±2% für Proben > 10 mg/ml

Aufgereinigte BSA durch Proteine & Marker

0,06 mg/ml (Messplatz)

0,006 mg/ml (Küvette)

19 mg/ml (Messplatz)

± 0,06 mg/ml (für Proben mit 0,06–10 mg/ml)

Protein-BCA

0,125 mg/ml (20:1 Reagenz/Probenvolumen)

0,02 mg/ml (1:1 Reagenz/Probenvolumen)

2,0 mg/ml

0,20 mg/ml

2% über den gesamten Bereich

0,01 mg/ml über den gesamten Bereich

Protein Lowry

0,2 mg/ml

1,5 mg/ml

2% über den gesamten Bereich

Protein Bradford

100 µg/ml (30:1 Reagenz/Probenvolumen)

15 µg/ml (1:1 Reagenz/Probenvolumen)

1000 µg/ml

 

100 µg/ml

±25 µg/ml für Proben mit 100–500 µg/ml
±5% für Proben mit 500–1000 µg/ml

±4µg/ml für Proben mit 15–50 µg/ml
±5% für Proben mit 50–100 µg/ml

Protein Pierce 660

50 µg/ml (15:1 Reagenz/Probenvolumen)

25 µg/ml (7,5:1 Reagenz/Probenvolumen)

2000 µg/ml

 

1000 µg/ml

±3 µg/ml für Proben mit 50–125 µg/ml
±2% für Proben > 125 µg/ml

±3 µg/ml für Proben mit 25–125 µg/ml
±2% für Proben > 125 µg/ml

aBasierend auf fünf Wiederholungen (SD = ng/μl; CV = %)

 

Note  Um Messfehler bei hochkonzentrierten Proben zu minimieren, verdünnen Sie die Proben, um sicherzustellen, dass die Messungen innerhalb dieser Extinktionsgrenzen durchgeführt werden:

Bei Messungen von Mikrovolumen sollte die maximale Extinktion bei 260 nm (für Nukleinsäuren) oder 280 nm (für Proteine) weniger als 62,5 E betragen.

Bei Messungen mit Küvetten mit einer Schichtdicke von 10 mm sollte die maximale Extinktion bei 260 nm (oder 280 nm bei Proteinen) weniger als 1,5 E betragen, was etwa 75 ng/µl dsDNA entspricht.