Messung von Protein E280 Pro

Verwenden Sie die Protein E280-Anwendung, um gereinigte Proteinproben zu quantifizieren, die Aminosäuren wie Tryptophan oder Tyrosin oder Cys-Cys-Disulfatbindungen enthalten, die bei höheren Konzentrationen (> 62,5 A) eine Extinktion bei 280 nm mit erhöhter Genauigkeit zeigen. Diese Anwendung meldet die bei 280 nm gemessene Proteinkonzentration und ein Extinktionsverhältnis (E260/E280). Auch eine Einzelpunkt-Basislinienkorrektur kann vorgenommen werden. Für diese Anwendung ist keine Standardkurve erforderlich.

 

 

Vor Beginn...

Bevor Sie die Messungen mit dem NanoDrop Ultra-Gerät durchführen, stellen Sie den Gerätearm auf und reinigen Sie die oberen und unteren Messplätze. Wischen Sie die Messplätze mindestens mit einem neuen Labor-Wischtuch ab. Weitere Informationen finden Sie unter Reinigung der Messplätze.

Note  Wenn Ihre Proben hauptsächlich Peptidbindungen und wenige oder keine Aminosäuren  enthalten, verwenden Sie die Protein E205-Anwendung statt Protein E280 Pro.

NOTICE    

Verwenden Sie keine Spritzen oder Sprühflasche auf oder in der Nähe des Geräts, da Flüssigkeiten in das Gerät fließen und dauerhafte Schäden verursachen können.

Verwenden Sie an den Messplätzen keine Fluorwasserstoffsäure (HF). Fluoridionen schädigen die Quarzglasfaserkabel dauerhaft.

Verfahren

1. Wählen Sie auf dem Startbildschirm die Registerkarte Acclaro Pro und dann Protein A280 Pro.

2. Passen Sie bei Bedarf eine der setup options (Einstellungsoptionen) an und klicken Sie auf Save (Speichern).

3. Pipettieren Sie 1–2 µl Leerwertlösung auf den unteren Messplatz und senken Sie den Gerätearm ab.

4. Wählen Sie Blank (Leerprobe) und warten Sie, bis die Messung abgeschlossen ist.

Tipp: Wenn Auto-Blank (Auto-Messung)  auf On (Ein) steht, beginnt die Leerprobenmessung automatisch, nachdem Sie den Gerätearm gesenkt haben.

5. Stellen Sie den Arm auf und reinigen Sie beide Messplätze mit einem frischen Labor-Wischtuch.

6. Pipettieren Sie 2 µl der Probenlösung auf den Messplatz.

7. Starten Sie die Probenmessung:

Wenn Auto-Measure (Auto-Messung)  auf On (ein) steht, senken Sie den Gerätearm; wenn Auto-Measure (Auto-Messung) auf Off Aus) steht, senken Sie den Gerätearm und tippen dann auf Measure.

Wenn die Probenmessung abgeschlossen ist, werden das Spektrum und die berichteten Werte angezeigt (siehe nächster Abschnitt).

8. Wenn Sie mit dem Messen der Proben fertig sind, wählen Sie End Experiment (Versuch beenden).

9. Stellen Sie den Arm auf und reinigen Sie beide Messplätze mit einem frischen Labor-Wischtuch.

 

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