Controllo delle prestazioni di fluorescenza
Eseguire il controllo delle prestazioni di fluorescenza ogni 6 mesi per confermare che le prestazioni e l’accuratezza della fluorescenza rientrino nelle specifiche. Questo modulo è disponibile solo sugli strumenti NanoDrop Ultra FL e NanoDrop Ultrac FL.
Forniture necessarie
• kit del test di verifica della fluorescenza FL-1 (CHEM-FL1-KIT)
–Soluzione di reagente per bianco
–Reagente a fluorescenza verde
–Reagente a fluorescenza rosso lontano
• provette di plastica, da 0,2 mL, con tappo piatto o simili
• salviette da laboratorio prive di pelucchi
• acqua deionizzata (DI H2O)
• pipettatore di precisione calibrato (0–2 µL)
• guanti da laboratorio
• agitatore Vortex
• mini centrifuga
Prima di iniziare
Predisporre tre provette sterili di plastica color ambra per ciascuno dei tre reagenti forniti nel kit di verifica della fluorescenza FL-1 (reagente bianco, reagente a fluorescenza verde e reagente a fluorescenza rosso lontano) e contrassegnarle come Bianco, Standard 2 verde e Standard 2 rosso lontano.
Preparare altre due provette sterili di plastica color ambra per le diluizioni sia del reagente a fluorescenza verde sia del reagente a fluorescenza rosso lontano e contrassegnarle come Standard 1 verde e Standard 1 rosso lontano.
Provetta del bianco
–Aggiungere 50 µL di reagente per bianco nella provetta del bianco.
Provetta Standard 2 verde
–Aggiungere 22 µL di reagente di fluorescenza verde.
Provetta Standard 2 rosso lontano
–Aggiungere 30 µL di reagente di fluorescenza rosso lontano.
Provetta Standard 1 verde
–Trasferire 18 µL di reagente per bianco dalla provetta contrassegnata come Bianco.
–Trasferire 2 µL di Standard 2 verde e agitare su Vortex per 3-5 secondi.
–Centrifugare brevemente; un reagente di fluorescenza verde diluito 10 volte è pronto.
Provetta Standard 1 rosso lontano
–Trasferire 10 µL di reagente per bianco dalla provetta contrassegnata come Bianco.
–Trasferire 10 µL di Standard 2 rosso lontano e agitare su Vortex per 3-5 secondi.
–Centrifugare brevemente; un reagente di fluorescenza rosso lontano diluito 2 volte è pronto.
Per eseguire un controllo delle prestazioni di fluorescenza
1. Nella schermata iniziale, selezionare l’icona Diagnostica , quindi Fluorescence Performance Verification (Verifica delle prestazioni di fluorescenza).
2. Verrà visualizzato un messaggio che indica che il test richiede l’uso del kit di verifica della fluorescenza FL-1; selezionare Run (Esegui).
3. Assicurarsi che non ci sia nulla sul piedistallo e selezionare Blank (Bianco).
4. Pipettare 2 µL di reagente per bianco dalla provetta del Bianco sul piedistallo inferiore.
a.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) è attivata , abbassare il braccio.
b.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) non è attivata , abbassare il braccio e selezionare Measure (Misura).
5. Sollevare il braccio e pulire entrambi i piedistalli con una salvietta nuova.
6. Ripetere i passaggi 4 e 5 per un totale di cinque misurazioni.
7. Pipettare 2 µL del reagente di fluorescenza verde diluito dalla provetta Standard 1 verde sul piedistallo inferiore.
a.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) è attivata, abbassare il braccio.
b.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) non è attivata, abbassare il braccio e selezionare Measure (Misura).
8. Sollevare il braccio e pulire entrambi i piedistalli con una salvietta nuova.
9. Ripetere i passaggi 7 e 8 per un totale di cinque misurazioni.
10. Pipettare 2 µL del reagente di fluorescenza verde dalla provetta Standard 2 verde sul piedistallo inferiore.
a.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) è attivata, abbassare il braccio.
b.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) non è attivata, abbassare il braccio e selezionare Measure (Misura).
11. Sollevare il braccio e pulire entrambi i piedistalli con una salvietta nuova.
12. Ripetere i passaggi 10 e 11 per un totale di cinque misurazioni.
13. Pipettare 2 µL di reagente per bianco dalla provetta del Bianco sul piedistallo inferiore.
a.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) è attivata, abbassare il braccio.
b.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) non è attivata, abbassare il braccio e selezionare Measure (Misura).
14. Sollevare il braccio e pulire entrambi i piedistalli con una salvietta nuova.
15. Ripetere i passaggi 13 e 14 per un totale di cinque misurazioni.
16. Pipettare 2 µL del reagente di fluorescenza rosso lontano diluito dalla provetta Standard 1 rosso lontano sul piedistallo inferiore.
a.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) è attivata, abbassare il braccio.
b.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) non è attivata, abbassare il braccio e selezionare Measure (Misura).
17. Sollevare il braccio e pulire entrambi i piedistalli con una salvietta nuova.
18. Ripetere i passaggi 16 e 17 per un totale di cinque misurazioni.
19. Pipettare 2 µL del reagente di fluorescenza rosso lontano dalla provetta Standard 2 rosso lontano sul piedistallo inferiore.
a.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) è attivata, abbassare il braccio.
b.Se Auto-Measure (Misurazione automatica) non è attivata, abbassare il braccio e selezionare Measure (Misura).
20. Sollevare il braccio e pulire entrambi i piedistalli con una salvietta nuova. Ripetere i passaggi 19 e 20 per un totale di cinque misurazioni.
Per interpretare i risultati del controllo delle prestazioni di fluorescenza
Il risultato complessivo del test verrà visualizzato nella parte superiore dello schermo con un messaggio verde “Pass” (Superato) o rosso “Fail” (Non superato).
Se i risultati non rientrano nelle specifiche, ripetere la procedura con nuove diluizioni dei reagenti FL-1.
Se i risultati non soddisfano le specifiche dopo il secondo tentativo, contattare la nostra azienda.