Limiti di rilevamento per applicazioni basate sull’assorbanza

Tipo di campione

Limite inferiore di rilevamento

Limite superiore di rilevamento

Riproducibilità tipicaa

dsDNA
(piedistallo)

1,0 ng/µL (piedistallo)

0,20 ng/µL (cuvetta)

27.500 ng/µL (piedistallo)

75 ng/µL (cuvetta)

±1,0 ng/µL per concentrazioni di campione comprese tra 1,0 e 100 ng/µL;
±2% per campioni >100 ng/µL

ssDNA

0,66 ng/µL (piedistallo)

0,13 ng/µL (cuvetta)

18.150 ng/µL (piedistallo)

49,5 ng/µL (cuvetta)

±0,66 ng/µL per concentrazioni di campione comprese tra 0,66 e 100 ng/µL;
±2% per campioni >100 ng/µL

RNA
(piedistallo)

0,8 ng/µL (piedistallo)

0,16 ng/µL (cuvetta)

22.000 ng/µL (piedistallo)

60 ng/µL (cuvetta)

±0.8 ng/µL per concentrazioni di campioni comprese tra 0.8 e 100 ng/µL;
±2% per campioni >100 ng/µL

Microarray di DNA
(ssDNA)

0,66 ng/µL (piedistallo)

0,13 ng/µL (cuvetta)

495 ng/µL (piedistallo)

49,5 ng/µL (cuvetta)

±0,66 ng/µL per concentrazioni di campione comprese tra 0,66 e 100 ng/µL;
±2% per campioni >100 ng/µL

BSA purificata mediante Protein A280

IgG mediante Protein A280

0,03 mg/mL (piedistallo)
0,006 mg/mL (cuvetta)

0,02 mg/mL (piedistallo)
0,003 mg/mL (cuvetta)

820 mg/mL (piedistallo)

402 mg/mL (piedistallo)

±0,03 mg/mL (per campioni da 0,03–10 mg/mL);
±2% per campioni >10 mg/mL

BSA purificata mediante Proteins & Labels

0,03 mg/mL (piedistallo)

0,006 mg/mL (cuvetta)

19 mg/mL (piedistallo)

±0,06 mg/mL (per campioni da 0,06–10 mg/mL)

Protein BCA

0,125 mg/mL (volume di reagente/
campione 20:1)

0,02 mg/mL (volume di reagente/
campione 1:1)

2,0 mg/mL

0,20 mg/mL

2% per l’intero intervallo

0,01 mg/mL per l’intero intervallo

Protein Lowry

0,2 mg/mL

1,5 mg/mL

2% per l’intero intervallo

Protein Bradford

100 mg/mL (volume di reagente/
campione 30:1)

15 mg/mL (volume di reagente/
campione 1:1)

1.000 µg/mL

 

100 µg/mL

±25 µg/mL per campioni da
100–500 µg/mL
±5% per campioni da
500–1.000 µg/mL

±4 µg/mL per campioni da
15–50 µg/mL
±5% per campioni da 50–100 µg/mL

Protein Pierce 660

50 µg/mL (volume di reagente/
campione 15:1)

25 µg/mL (volume di reagente/
campione 7,5:1)

2.000 µg/mL

 

1.000 µg/mL

±3 µg/mL per campioni da
50–125 µg/mL
±2% per campioni >125 µg/mL

±3 µg/mL per campioni da
25–125 µg/mL
±2% per campioni >125 µg/mL

aBasato su cinque replicati (DS=ng/µL; CV=%)

 

Nota  Per ridurre al minimo l’errore dello strumento con campioni altamente concentrati, effettuare delle diluizioni per garantire che le misurazioni siano effettuate entro i seguenti limiti di assorbanza:

Per le misurazioni microvolumetriche, l’assorbanza massima a 260 nm (per gli acidi nucleici) o a 280 nm (per le proteine) deve essere inferiore a 62,5 A.

Per le misurazioni con cuvette con lunghezza del percorso di 10 mm, l’assorbanza massima a 260 nm (o 280 nm per le proteine) deve essere inferiore a 1,5 A, ovvero circa 75 ng/µL di dsDNA.